职业卫生标准 · GBZ/T 240.21-2011

化学品毒理学评价程序和试验方法第21部分：致畸试验

GBZ/T 240.21—2011 规定动物致畸试验：选择妊娠大鼠或家兔，在胚胎器官形成期染毒，分娩前检查母体、胎仔外观、骨骼及内脏；以畸胎率等指标比较剂量组与对照组。附录A给出胎鼠检查和统计方法，附录B给出茜素红液与 Bouin’s 液配方。原文实施日期为2012-03-01；本版当前现行性未获官方明示，保持 unknown。

GBZ/T 240.21-2011待核实发布：2011-08-19实施：2012-03-01

下载标准 PDF（原始版）

标准解读

适用范围

规定动物致畸试验的目的、概述、方法、数据处理、评价报告和结果解释；用途为检测化学品致畸性。

依据：PDF 第 4 页，1

引用文件与总则关系

规范性引用文件包括 GBZ/T 224 和 GBZ/T 240.1；未注日期的引用采用最新版本。

依据：PDF 第 4 页，2

母体毒性定义

母体毒性是对亲代雌性妊娠动物造成的直接或间接健康损害效应。

依据：PDF 第 4 页，3.1

试验目的

检测妊娠动物接触化学品后是否可能引起胎仔畸形。

依据：PDF 第 4 页，4

试验总体流程

设多个剂量组，在胚胎器官形成期染毒，分娩前剖检妊娠动物并检查吸收胎、死胎、活胎以及骨骼、内脏畸形。

依据：PDF 第 4 页，5

动物选择与最低妊娠数

首选健康、初成年、未交配的雌性大鼠或家兔；适应至少3 d。每组妊娠动物数：大鼠至少15只，家兔至少12只。

依据：PDF 第 4 页，6.1；PDF 第 4 页，6.1

剂量组、对照组与限量试验

至少3个剂量组和1个阴性对照组，必要时加阳性对照。高剂量出现母体明显毒性但母体死亡不超过10%；低剂量无可观察毒性。低毒且1 000 mg/kg体重时胚胎无明显毒性或致畸作用，可采用限量试验。

阳性对照物可选环磷酰胺、阿司匹林或维生素A；阴性对照除不给受试样品外，其他处理与剂量组相同。
可预试验了解引起胚胎或胎仔死亡的剂量；高剂量有明显母体毒性但不得引起超过10%的母体死亡，低剂量无可观察毒性，中间剂量可按几何级数设置。
低毒样品在1 000 mg/kg体重时胚胎无明显毒性或致畸作用，可采用不设其他剂量组的限量试验；高剂量预试验有一定母体毒性而胚胎无不良影响时亦可考虑。

依据：PDF 第 5 页，6.2；PDF 第 5 页，6.2；PDF 第 5 页，6.2

染毒途径与给药时间

通常经口灌胃，也可用与人接触方式相同的途径；每天同一时间染毒；灌胃时按母体体重确定每日剂量。

依据：PDF 第 5 页，6.3.1

交配判定与器官形成期窗口

查到精子或阴栓当日为妊娠第0天。器官形成期每日一次染毒：大鼠孕后6 d～15 d，家兔孕后6 d～18 d。

依据：PDF 第 5 页，6.3.2；PDF 第 5 页，6.3.2

母体临床观察

每日临床观察并称重，每周记录摄食量；记录毒性反应的出现时间、程度和持续时间，死亡动物需尸检。

依据：PDF 第 5 页，6.3.3.2；PDF 第 5 页，6.3.3.3

分娩前剖检时间

分娩前一天剖检；条款列大鼠妊娠第20天、小鼠第18天、家兔妊娠后第29天。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4

子宫与胎仔计数

取出子宫，称子宫、胎盘和活胎重量，记录着床、活胎、死胎、吸收胎数。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.1

胎仔外观检查

逐胎记录活胎身长、尾长，分别观察头部、躯干与四肢外观异常；附录A给出胎鼠畸形检查方法。

头部观察无脑、脑膨出、露脑、头盖裂、脑积水、小头、颜面裂、眼与耳及颌部异常等。
躯干观察胸骨/胸部/脊椎裂、脊柱弯曲、脐疝、尿道下裂、无肛门、尾部和腹壁异常。
四肢观察多肢、无肢、短肢、半肢、多趾、无趾、并趾、短趾和缺趾。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.2；PDF 第 5 页，6.3.4.2

骨骼检查与染色

每窝一半胎仔经茜素红染色检查骨骼，覆盖颅骨、脊柱、骨盆、四肢、肋骨、胸骨等骨化与形态。

观察囟门、矢状缝、头顶间骨和后头骨；脊柱骨数目、融合、裂开、骨化中心及形状。
观察骨盆骨化中心和形态，四肢骨数目形态、腕骨骨化中心、掌骨与趾骨。
观察肋骨数目、形状、融合、分叉、缺损、发育不全，以及胸骨形态、缺失、胸骨节融合和发育。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.3；PDF 第 6 页，6.3.4.3

内脏检查与家兔例外

另一半胎仔在 Bouin’s 液固定两周后检查脏器和软组织；家兔每胎仔均做脏器和骨骼检查。

头部观察嗅球、侧/第三脑室、角膜等异常。
胸部观察心位、房/室间隔、主动脉弓、食道闭锁、肺、膈疝和气管食管瘘等。
腹部观察肝分叶、肾上腺、肾/输尿管、膀胱及生殖器官等。

依据：PDF 第 6 页，6.3.4.4；PDF 第 6 页，6.3.4.4

总畸胎率、单项畸胎率与致畸指数

以活胎为分母计算每组总畸胎率和某单项畸胎率；一胎多畸形在总率按一个畸胎计，单项率按类型分别计；致畸指数为雌性动物 LD₅₀ 与最小致畸剂量之比。

总畸胎率=畸形活胎数/活胎总数×100%；单项畸胎率=某畸形活胎数/活胎总数×100%；致畸指数=雌性动物LD₅₀/最小致畸剂量

依据：PDF 第 6 页，7.1；PDF 第 6 页，7.1；PDF 第 6 页，7.1

结果评价与剂量结论

评价结合动物品系历史畸形背景；与对照相比畸胎率明显且显著升高支持该剂量致畸；结果应判断母体/胚胎毒性及致畸性，尽量给出无致畸和最小致畸剂量。

依据：PDF 第 6 页，7.2.1；PDF 第 6 页，7.2.2；PDF 第 6 页，7.2.3

评价报告新增内容

除 GBZ/T 240.1 一般项目外，还须列给药方法/期限、孕鼠体重和妊娠、受孕/黄体/着床/胎仔计数与百分率、胎仔体格及畸形类别。

依据：PDF 第 6 页，8；PDF 第 6 页，8

动物到人的外推限制

解释时必须考虑种属差异，动物致畸结果外推到人有限制。

依据：PDF 第 6 页，9

附录A外观分部检查

胎鼠先肉眼检查，难定时显微镜确认并照相；依次看头、四肢、躯干和尾。

依据：PDF 第 7 页，A.1；PDF 第 7 页，A.2；PDF 第 7 页，A.3；PDF 第 7 页，A.4；PDF 第 7 页，A.5

附录A标本制备和透明

每窝胎鼠分半固定作内脏/骨骼检查；骨骼标本经1% KOH软化、茜素红16 h染色、50%甘油3–5 d脱色。

依据：PDF 第 7 页，A.6；PDF 第 7 页，A.7；PDF 第 7 页，A.8；PDF 第 7 页，A.9

上枕骨骨化0～Ⅳ级

附录A.10.1用0、Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ五级区分上枕骨骨化，从完全融合到无骨化点；0级融合处宽度大于两侧1/3，Ⅰ级小于1/3。

等级	上枕骨骨化特征
0	两侧完全融合，融合处宽度大于两侧1/3
Ⅰ	两侧相连，相连处宽度小于两侧1/3
Ⅱ	两侧不相连，可见两个较大骨化点
Ⅲ	两侧不相连，仅小骨化点或一侧骨化点
Ⅳ	无上枕骨骨化点

依据：PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1

胸部骨骼及头部/内脏切片

附录A列胸骨、肋骨正常数量与畸形观察；头部五刀分层检查，胸腹壁两刀暴露内脏。

头部五刀依次暴露舌腭、鼻中隔与鼻窦、眼组织与脑鼻叶、大脑半球与侧脑室、间脑第三脑室及脉络膜。
胸腹沿胸腹壁中线与肋下水平线各切一刀，检查内脏。

依据：PDF 第 8 页，A.10.2；PDF 第 8 页，A.10.2；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.13

附录A统计指标和计算式

附录A给活胎率、死胎率、吸收胎率、畸形率及孕鼠体重净增长公式；计量资料均数±标准差并用F检验，计数资料用百分率及χ²检验。

活胎率=活胎数/胎鼠数×100%；死胎率=死胎数/胎鼠数×100%；吸收胎率=吸收胎数/着床数×100%；畸形率=畸形仔鼠数/受检胎鼠数×100%；孕鼠体重净增长=解剖前体重-受孕第6天体重-含胎子宫重

依据：PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14

茜素红液配方

茜素红液配方列冰醋酸5 mL、纯甘油10 mL、1%水合氯醛60 mL；临用以1% KOH稀释为0.1%应用液。

成分/操作	用量/条件
冰醋酸	5 mL
纯甘油	10 mL
1%水合氯醛	60 mL
临用稀释	用1% KOH稀释成0.1%应用液

依据：PDF 第 9 页，B.1；PDF 第 9 页，B.1

Bouin’s液配方

Bouin’s液由苦味酸饱和液75 mL、甲醛25 mL、冰醋酸5 mL混合使用。

成分	用量
苦味酸饱和液	75 mL
甲醛	25 mL
冰醋酸	5 mL

依据：PDF 第 9 页，B.2；PDF 第 9 页，B.2

关键问题问答

本部分用于检测什么，覆盖哪些环节？

用于检测化学品的致畸性；覆盖试验目的、概述、方法、数据处理与结果评价、评价报告和结果解释。

依据：PDF 第 4 页，1

本部分与 GBZ/T 240.1 有什么关系？

GBZ/T 240.1《第1部分：总则》是本部分的规范性引用文件；其术语定义和评价报告一般项目在本部分被沿用。

依据：PDF 第 4 页，2

这里的“母体毒性”指什么？

指引起亲代雌性妊娠动物直接或间接的健康损害效应。

依据：PDF 第 4 页，3.1

致畸试验要回答的核心问题是什么？

检测妊娠动物接触化学品后引起胎仔畸形的可能性。

依据：PDF 第 4 页，4

致畸试验的主要流程是什么？

在多个剂量组中，于妊娠动物胚胎器官形成期染毒；胎仔出生前剖检，记录吸收胎、死胎、活胎并检查胎仔骨骼和内脏畸形。

依据：PDF 第 4 页，5

致畸试验选什么动物、每组至少多少只妊娠动物？

首选健康、刚进入性成熟期且未经交配的雌性大鼠或家兔；试验前至少适应3 d。每剂量组和对照组大鼠至少15只妊娠动物，家兔至少12只。

依据：PDF 第 4 页，6.1；PDF 第 4 页，6.1

剂量组怎样设置，什么条件可作限量试验？

至少3个剂量组和1个阴性对照组，必要时设阳性对照；高剂量应有明显母体毒性但母体死亡不得超过10%，低剂量不应有可观察毒性。若毒性较低且1 000 mg/kg体重时对胚胎无明显毒性或致畸作用，可不设其他剂量组作限量试验。

依据：PDF 第 5 页，6.2；PDF 第 5 页，6.2；PDF 第 5 页，6.2

染毒通常采用什么途径，时间如何控制？

通常经口灌胃，也可采用其他与人接触方式相同的给药方式；每天应在同一时间进行染毒。

依据：PDF 第 5 页，6.3.1

妊娠第0天如何确定，大鼠和家兔何时染毒？

发现精子或阴栓的当天计妊娠第0天；大鼠在孕后6 d～15 d、家兔在孕后6 d～18 d的器官形成期每天染毒一次。

依据：PDF 第 5 页，6.3.2；PDF 第 5 页，6.3.2

母体动物在试验期间要记录哪些变化？

每日观察临床状态并称量妊娠动物体重，每周记录摄食量；对任何毒性反应记录出现时间、程度和持续时间，对死亡动物作尸检。

依据：PDF 第 5 页，6.3.3.2；PDF 第 5 页，6.3.3.3

妊娠动物什么时候剖检？

分娩前一天处死并立即解剖；原文列大鼠妊娠第20天、小鼠第18天、家兔妊娠后第29天。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4

子宫观察要称重并计数哪些项目？

称取子宫、胎盘及活胎重量；记录着床数、活胎数、死胎数和吸收胎数。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.1

外观检查要看哪些部位和基本量值？

逐一记录活胎仔身长、尾长，检查头部、躯干和四肢畸形；附录A列出胎鼠的具体检查顺序。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.2；PDF 第 5 页，6.3.4.2

骨骼检查用哪部分胎仔、主要观察什么？

每窝取约一半胎仔用茜素红液染色，检查颅骨、脊柱、骨盆、四肢、肋骨和胸骨的骨化中心、形态、数目及融合等异常。

依据：PDF 第 5 页，6.3.4.3；PDF 第 6 页，6.3.4.3

内脏检查如何分配胎仔，家兔有何不同？

通常将每窝另一半胎仔放入 Bouin’s 液固定两周后检查脏器和软组织；家兔则每个胎仔都应作脏器与骨骼检查。

依据：PDF 第 6 页，6.3.4.4；PDF 第 6 页，6.3.4.4

总畸胎率、单项畸胎率和致畸指数怎样计算？

总畸胎率＝出现畸形的活胎总数÷该组母体所产活胎总数×100%；单项畸胎率分子换为出现某种畸形的活胎总数。一胎多畸形总率按一个畸胎计，单项按类型计。致畸指数＝雌性动物 LD₅₀÷最小致畸剂量。

依据：PDF 第 6 页，7.1；PDF 第 6 页，7.1；PDF 第 6 页，7.1

怎样依据畸胎率评价某剂量的致畸作用？

结合动物品系的历史畸形种类和频率；若该剂量组总畸胎率或某单项畸胎率比对照组明显升高且有统计学显著性，可表明该剂量有致畸作用。还应评价母体或胚胎毒性。

依据：PDF 第 6 页，7.2.1；PDF 第 6 页，7.2.2；PDF 第 6 页，7.2.3

本部分要求评价报告额外列出哪些内容？

除总则一般项目外，应列给药方法和期限、孕鼠体重增长及妊娠情况、受孕动物与黄体/着床/吸收胎/活胎/死胎计数及百分率，以及胎仔体重、胎盘重、体长、尾长和外观/骨骼/内脏畸形类型、数量与百分率。

依据：PDF 第 6 页，8；PDF 第 6 页，8

动物致畸结果能直接当作人体结论吗？

不能直接等同。第9章提示应注意种属差异，动物试验结果外推到人存在一定局限。

依据：PDF 第 6 页，9

附录A如何做胎鼠外观初查？

每只胎鼠先肉眼检查；无法确定畸形时用解剖显微镜进一步确定并照相。检查覆盖头部、四肢、躯干和尾部。

依据：PDF 第 7 页，A.1；PDF 第 7 页，A.2；PDF 第 7 页，A.3；PDF 第 7 页，A.4；PDF 第 7 页，A.5

附录A的骨骼标本怎样制备？

一半胎鼠用95%酒精固定作骨骼检查；用1% KOH软化，茜素红应用液染色16 h，再置50%甘油中脱色3 d～5 d。另一半用 Bouin’s 液固定作内脏检查。

依据：PDF 第 7 页，A.6；PDF 第 7 页，A.7；PDF 第 7 页，A.8；PDF 第 7 页，A.9

胎鼠上枕骨骨化等级怎样区分？

0级两侧骨化点完全融合且融合处宽度大于两侧1/3；Ⅰ级相连但小于1/3；Ⅱ级不相连而有两个较大骨化点；Ⅲ级仅小骨化点或一侧骨化点；Ⅳ级无骨化点。

依据：PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1；PDF 第 8 页，A.10.1

附录A如何检查头部切片和胸腹内脏？

头部依次五刀检查舌腭、鼻腔、眼组织、脑半球和脑室等；胸腹沿中线及肋下水平线各切一刀，暴露内脏检查异常。附录还提示正常胸骨6块、小鼠肋骨13对。

依据：PDF 第 8 页，A.10.2；PDF 第 8 页，A.10.2；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.12；PDF 第 8 页，A.13

附录A有哪些统计计算式，分母分别是什么？

活胎率和死胎率均以胎鼠数为分母；吸收胎率以着床数为分母；畸形率以受检胎鼠数为分母，均乘100%。孕鼠体重净增长＝解剖前体重－受孕第6天体重－含胎子宫重。

依据：PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14；PDF 第 8 页，A.14

附录B.1的茜素红液如何配制？

冰醋酸5 mL、纯甘油10 mL、1%水合氯醛60 mL；临用时用1% KOH稀释成0.1%应用液。

依据：PDF 第 9 页，B.1；PDF 第 9 页，B.1

附录B.2的 Bouin’s 液如何配制？

苦味酸饱和液75 mL、甲醛25 mL、冰醋酸5 mL，混合使用。

依据：PDF 第 9 页，B.2；PDF 第 9 页，B.2

来源与版本

查看官方来源

当前官方详情页展示标准编号、名称和日期，未明确展示本版现行性或替代状态；保持 unknown，不从年份推断。

资料获取时间：2026-09-28T03:55:43.657804+08:00。PDF：9 页。