职业卫生标准 · GBZ/T 334—2024

尿中亚硫基二乙酸测定标准离子色谱法

规定职业接触氯乙烯人员尿中亚硫基二乙酸的离子色谱测定，涵盖样本采集保存、仪器/试剂、校准、样品处理、计算和质量控制。第10.3条的尿比重单位写法需复核。

GBZ/T 334—2024待核实发布：2024-05-09实施：2024-11-01

标准解读

封面及发布信息

ICS 13.100 CCS C 52 中华人民共和国国家职业卫生标准 GBZ/T 334—2024 代替WS/T 63—1996 尿中亚硫基二乙酸测定标准离子色谱法 Determination standard of thiodiglycolic acid in urine— Ion chromatographic method 2024-05-09 发布 2024-11-01 实施

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前言

前言本标准为推荐性标准。本标准代替WS/T 63—1996《尿中亚硫基二乙酸的气相色谱测定方法》，与WS/T 63—1996相比，主要技术变化如下： ——删除了尿中亚硫基二乙酸的气相色谱法（见1996年版）； ——增加了尿中亚硫基二乙酸离子色谱法（见第4章）。本标准由国家卫生健康标准委员会职业健康标准专业委员会负责技术审查和技术咨询，由中国疾病预防控制中心负责协调性和格式审查，由国家卫生健康委职业健康司负责业务管理、法规司负责统筹管理。本标准起草单位：北京市化工职业病防治院（北京市职业病防治研究院）、中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所、国家卫生健康委职业安全卫生研究中心、深圳市职业病防治院。本标准主要起草人：潘兴富、刘晓东、牛东升、丁晓文、郭启芬、赵玮、崔师伟、郑玉桥、李添娣、贠建培。本标准及其所代替标准的历次版本发布情况为： ——1996年首次发布为WS/T 63—1996； ——本次为第一次修订。

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1 范围

1 范围本标准规定了尿中亚硫基二乙酸的离子色谱测定法。本标准适用于职业接触氯乙烯人员尿中亚硫基二乙酸浓度的测定。

依据：PDF 第 3 页，1

2 规范性引用文件

2 规范性引用文件下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本标准必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，仅该日期对应的版本适用于本标准；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本标准。 GBZ/T 210.5 职业卫生标准制定指南第5部分：生物材料中化学物质测定方法 GBZ/T 224 职业卫生名词术语 GBZ/T 295 职业人群生物监测方法总则

依据：PDF 第 3 页，2

3 术语和定义

3 术语和定义 GBZ/T 224及GBZ/T 295界定的术语和定义适用于本标准。

依据：PDF 第 3 页，3

4 原理

4 原理尿样用固相萃取小柱净化，经阴离子交换色谱柱分离，电导检测器检测，以保留时间定性，测定峰面积或峰高，采用外标标准曲线法定量。

依据：PDF 第 3 页，4

5 仪器

依据：PDF 第 3 页，5

5.1 条款 5.1

5.1 条款 5.1 纯水机。

依据：PDF 第 3 页，5.1

5.2 条款 5.2

5.2 条款 5.2 离心机。

依据：PDF 第 3 页，5.2

5.3 条款 5.3

5.3 条款 5.3 涡旋振荡器。

依据：PDF 第 3 页，5.3

5.4 条款 5.4

5.4 条款 5.4 尼龙滤膜过滤头：0.22 μm。

依据：PDF 第 3 页，5.4

5.5 条款 5.5

5.5 条款 5.5 电子天平：感量0.01 mg。

依据：PDF 第 3 页，5.5

5.6 条款 5.6

5.6 条款 5.6 尿比重折射仪。

依据：PDF 第 3 页，5.6

5.7 条款 5.7

5.7 条款 5.7 固相萃取小柱ODS-C18（200 mg，3 mL），或等效萃取柱。

依据：PDF 第 3 页，5.7

5.8 条款 5.8

5.8 条款 5.8 离心管：50 mL、15 mL。

依据：PDF 第 3 页，5.8

5.9 条款 5.9

5.9 条款 5.9 离子色谱仪：配备电导检测器和阴离子抑制器。仪器操作参考条件： a) 色谱柱：IonPac AS19阴离子交换色谱柱（250 mm×4 mm），或其他等效离子交换色谱柱； b) 淋洗液：氢氧化钾溶液； c) 梯度淋洗模式：0 min～10 min，20.0 mmol/L；10 min～20 min，20.0 mmol/L～30.0 mmol/L； 20 min～30 min，30.0 mmol/L～60.0 mmol/L；30 min～36 min，60.0 mmol/L。 d) 淋洗液流速：1.0 mL/min；

e) 抑制器：抑制电流150 mA； f) 进样体积：25 μL。

依据：PDF 第 3 页，5.9；PDF 第 4 页，5.9

6 试剂

依据：PDF 第 4 页，6

6.1 条款 6.1

6.1 条款 6.1 亚硫基二乙酸：纯度≥99.5%。

依据：PDF 第 4 页，6.1

6.2 条款 6.2

6.2 条款 6.2 甲醇：色谱纯。

依据：PDF 第 4 页，6.2

6.3 条款 6.3

6.3 条款 6.3 去离子水：电阻率≥18.2 MΩ•cm 。

依据：PDF 第 4 页，6.3

6.4 条款 6.4

6.4 条款 6.4 亚硫基二乙酸标准溶液：准确称取亚硫基二乙酸标准品50.0 mg 于50 mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，所得浓度为1000 μg/mL 的标准贮备液，于冰箱4℃冷藏，可保存7 d。临用时用去离子水稀释成浓度为100.0 μg/mL 的标准应用液。

依据：PDF 第 4 页，6.4

7 样品的采集、运输和保存

依据：PDF 第 4 页，7

7.1 条款 7.1

7.1 条款 7.1 按照GBZ/T 295 的要求进行尿样采集和运输。

依据：PDF 第 4 页，7.1

7.2 条款 7.2

7.2 条款 7.2 样品采集：采集氯乙烯接触者班后2 h～10 h 的尿，或下一个班前尿，采样时防止污染。尿样的采集应大于20 mL。必要时采集双份样品，一份作为备份样品。

依据：PDF 第 4 页，7.2

7.3 条款 7.3

7.3 条款 7.3 样品空白：在样品采集的过程中，同时制备3 份样品空白。模拟采集去离子水，并与样品同时运输和储存。

依据：PDF 第 4 页，7.3

7.4 条款 7.4

7.4 条款 7.4 样品采集后，2 h 内用尿比重折射仪测尿样比重。

依据：PDF 第 4 页，7.4

7.5 条款 7.5

7.5 条款 7.5 样品运输：将采集后的样品和样品空白置于清洁容器中4 ℃冷链运输。

依据：PDF 第 4 页，7.5

7.6 条款 7.6

7.6 条款 7.6 样品保存：样品在4 ℃下可保存5 d；样品在-20 ℃下可保存14 d。

依据：PDF 第 4 页，7.6

8 分析步骤

依据：PDF 第 4 页，8

8.1 标准系列的配制和测定

8.1 标准系列的配制和测定用标准应用液和去离子水配制成浓度分别为0.00 μg/mL、0.05 μg/mL、0.10 μg/mL、0.50 μg/mL、 2.50 μg/mL、10.00 μg/mL、50.00 μg/mL 的标准系列溶液。按照仪器操作参考条件，将离子色谱仪调节至最佳测定状态，取25 μL 进样，测定标准系列，以保留时间定性，峰面积或峰高值对亚硫基二乙酸浓度（μg/mL）计算线性回归方程。

依据：PDF 第 4 页，8.1

8.2 活化小柱

8.2 活化小柱在固相萃取小柱中依次加入2 mL 甲醇和2 mL 去离子水，自然淋洗以活化固相萃取小柱，并用吸耳球吹掉柱内残液。

依据：PDF 第 4 页，8.2

8.3 样品处理

8.3 样品处理尿样放至室温，取10 mL 加入15 mL 离心管中，3 000 r/min 常温离心10 min；取上层尿样2.5 mL 于10 mL 容量瓶中，用去离子水定容至刻度，涡旋振荡1 min；准确量取2.0 mL 稀释后的尿样通过活化后的固相萃取小柱，用1.0 mL 去离子水淋洗小柱并用吸耳球吹出柱内残液，收集全部流出液，涡旋振荡1 min；用0.22 μm 尼龙滤膜过滤头过滤后转移到进样小瓶待测。或使用自动固相萃取装置处理。

依据：PDF 第 4 页，8.3

8.4 样品测定

用测定标准系列的仪器操作条件测定处理后的样品及样品空白溶液的峰面积或峰高，由回归方程得亚硫基二乙酸的浓度（μg/mL）。当样品空白检验结果大于方法检出限时，应对方法空白、采样容器空白、容器空白、试剂空白和仪器空白等进行检验，以确定样品空白结果的来源。样品浓度超过测定范围，可用去离子水稀释后测定，计算时乘以稀释倍数。

依据：PDF 第 4 页，8.4；PDF 第 5 页，8.4

8.5 质量控制

8.5 质量控制检测过程质量控制应按照GBZ/T 295 的要求进行。

依据：PDF 第 5 页，8.5

9 计算

依据：PDF 第 5 页，9

9.1 条款 9.1

9.1 条款 9.1 按式（1）计算尿样中亚硫基二乙酸的浓度： ρ = ρ0 × 6 × k……………………………………………… （1）式中： ρ ——尿样中亚硫基二乙酸质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； ρ0 ——由回归方程计算的亚硫基二乙酸质量浓度，单位为微克每毫升（μg/mL）； 6 ——稀释系数； k ——尿样换算成标准比重（1.020）下的浓度校正系数。

ρ = ρ₀ × 6 × k；ρ、ρ₀单位均为 μg/mL；6 为稀释系数；k 为换算到尿比重 1.020 的浓度校正系数。

依据：PDF 第 5 页，9.1

9.2 条款 9.2

9.2 条款 9.2 按照GBZ/T 295 中的方法测定尿比重，对检测结果进行比重较正。

依据：PDF 第 5 页，9.2

10 说明

依据：PDF 第 5 页，10

10.1 条款 10.1

10.1 条款 10.1 本标准按照GBZ/T 210.5 的方法和要求进行研制。

依据：PDF 第 5 页，10.1

10.2 条款 10.2

10.2 条款 10.2 本方法检出限为0.1 μg/mL，定量下限为0.3 μg/mL；方法测定范围为0.3 μg/mL～300.0 μg/mL；批内精密度范围为0.7%～5.0%；批间精密度范围为0.5%～8.8%；加标回收率为80.1%～104.2%。

依据：PDF 第 5 页，10.2

10.3 条款 10.3

10.3 条款 10.3 尿样应在冷冻前测定比重，剔除尿比重低于1.010 g/mL 和大于1.030 g/mL 的尿样。

依据：PDF 第 5 页，10.3

10.4 条款 10.4

10.4 条款 10.4 经实验，氟离子（F-）、氯乙酸根离子（C2H2ClO2-）、氯离子（Cl-）、二氯乙酸根离子（C2HCl2O2-）、亚硝酸根离子（NO2-）、硝酸根离子（NO3-）、碳酸根离子（CO3 2-）、硫酸根离子（SO4 2-）+三氯乙酸根离子（C2Cl3O2-）、磷酸根离子（PO4 3-）等均不存在干扰。

依据：PDF 第 5 页，10.4

10.5 条款 10.5

10.5 条款 10.5 色谱分离图见图1。注： 1——氟离子（F-）； 2——氯乙酸根离子（C2H2ClO2-）； 3——氯离子（Cl-）；

4——二氯乙酸根离子（C2HCl2O2-）； 5——亚硝酸根离子（NO2-）； 6——硝酸根离子（NO3-）； 7——碳酸根离子（CO3 2-）； 8——硫酸根离子（SO4 2-）+三氯乙酸根离子（C2Cl3O2-）； 9——亚硫基二乙酸根离子（TDGA）； 10——磷酸根离子（PO4 3-）。图1 色谱分离图

图1为原文色谱分离图，图内绘有标号1—10的色谱峰；标号对应的离子名称按本条图注列示，曲线、峰形及坐标应以物理PDF第5页原图为准。

依据：PDF 第 5 页，10.5；PDF 第 6 页，10.5

关键问题问答

GBZ/T 334—2024测定什么人群的什么指标，怎样定性和定量？

适用于职业接触氯乙烯人员尿中亚硫基二乙酸浓度测定。尿样经固相萃取净化、阴离子交换色谱柱分离，由电导检测器检测；以保留时间定性，以峰面积或峰高采用外标标准曲线法定量。本标准是测定方法，不能将方法的检出限直接作为职业接触限值或疾病诊断界值。

依据：PDF 第 3 页，1；PDF 第 3 页，4

样品处理和检测需要哪些关键仪器、耗材规格？

第5章列有纯水机、离心机、涡旋振荡器、尿比重折射仪，感量0.01 mg的电子天平，0.22 μm尼龙滤膜过滤头，ODS-C18固相萃取小柱（200 mg、3 mL）或等效柱，50 mL和15 mL离心管。离子色谱仪需配备电导检测器和阴离子抑制器；不能只凭具备色谱主机省略净化、过滤和比重测定环节。

依据：PDF 第 3 页，5.1～5.9

离子色谱的柱、梯度、流速、抑制电流和进样量如何设置？

参考条件为IonPac AS19阴离子交换色谱柱（250 mm×4 mm）或等效柱，氢氧化钾淋洗液：0～10 min为20.0 mmol/L；10～20 min从20.0升至30.0 mmol/L；20～30 min从30.0升至60.0 mmol/L；30～36 min为60.0 mmol/L。流速1.0 mL/min，抑制电流150 mA，进样25 μL。电流和进样量续列在下一物理页，应与前页梯度一起使用。

依据：PDF 第 3 页，5.9 a）～d）；PDF 第 4 页，5.9 e）～f）

试剂纯度、用水和标准贮备液保存条件是什么？

亚硫基二乙酸纯度≥99.5%，甲醇为色谱纯，去离子水电阻率≥18.2 MΩ·cm。准确称取50.0 mg标准品于50 mL容量瓶，以去离子水定容，得到1000 μg/mL贮备液；4 ℃冷藏可保存7 d，临用稀释为100.0 μg/mL标准应用液。贮备液的7 d期限不能套用于尿样保存。

依据：PDF 第 4 页，6.1～6.4

氯乙烯接触者应在何时留尿，采集多少？

按GBZ/T 295要求采集和运输；采集班后2 h～10 h尿，或下一个班前尿，采样时防止污染，尿量应大于20 mL。必要时采集双份，其中一份作备份。采集后2 h内用尿比重折射仪测定比重。

依据：PDF 第 4 页，7.1～7.4

样品空白需要几份，是否随尿样运输和储存？

采集过程中应同时制备3份样品空白，以去离子水模拟采集，并与样品同时运输、储存。第7.5条要求样品和样品空白均放入清洁容器，采用4 ℃冷链运输，不能仅在实验室分析时临时配一份水样代替采集空白。

依据：PDF 第 4 页，7.3；PDF 第 4 页，7.5

尿样冷藏与冷冻各能保存多久？

样品及样品空白以4 ℃冷链运输。尿样在4 ℃可保存5 d，在−20 ℃可保存14 d；应在冷冻前测定尿比重。冷冻期限与标准贮备液的保存期限属于不同对象，不可互换。

依据：PDF 第 4 页，7.5～7.6；PDF 第 5 页，10.3

标准曲线包含哪些浓度点，怎样建立回归关系？

用标准应用液和去离子水配制0.00、0.05、0.10、0.50、2.50、10.00、50.00 μg/mL系列，按操作参考条件调至最佳测定状态，每次进样25 μL。以保留时间定性，以峰面积或峰高对亚硫基二乙酸浓度计算线性回归方程。该标准系列是进样溶液浓度，不能与尿样方法测定范围直接混同。

依据：PDF 第 4 页，8.1；PDF 第 5 页，10.2

固相萃取柱如何活化，残液怎样处理？

依次向小柱加入2 mL甲醇和2 mL去离子水，自然淋洗活化，再用吸耳球吹掉柱内残液。加液顺序和残液处理属于第8.2条步骤，应在第8.3条尿样通过小柱前完成。

依据：PDF 第 4 页，8.2

离心、稀释、萃取和过滤的完整顺序是什么？

尿样恢复室温，取10 mL于15 mL离心管，3000 r/min常温离心10 min；取上层2.5 mL于10 mL容量瓶，以水定容并涡旋1 min。量取2.0 mL稀释尿通过活化小柱，用1.0 mL去离子水淋洗并吹出残液，收集全部流出液、涡旋1 min，经0.22 μm尼龙滤膜过滤后转入进样瓶；也可使用自动固相萃取装置处理。不得只收集部分流出液。

依据：PDF 第 4 页，8.3

样品空白超过检出限或样品超过测定范围时如何处理？

用与标准系列相同的仪器条件测定样品和空白，由回归方程求浓度。样品空白结果大于方法检出限时，应检验方法空白、采样容器空白、容器空白、试剂空白、仪器空白等，追查来源。样品超过测定范围时，可用去离子水稀释后测定，计算时乘以额外稀释倍数。

依据：PDF 第 5 页，8.4

怎样由回归浓度计算标准比重下的尿样浓度？

式（1）为ρ=ρ₀×6×k。ρ是尿样亚硫基二乙酸浓度，ρ₀是回归方程得到的浓度，均为μg/mL；6为前处理稀释系数，k是换算为标准比重1.020的浓度校正系数。第9.2条要求按GBZ/T 295测定尿比重并校正；如因超量程另行稀释，还须按第8.4条乘相应稀释倍数。

依据：PDF 第 5 页，9.1～9.2；PDF 第 5 页，8.4

方法检出限、定量下限和性能指标分别是多少？

第10.2条列明：方法检出限0.1 μg/mL，定量下限0.3 μg/mL，测定范围0.3～300.0 μg/mL；批内精密度0.7%～5.0%，批间0.5%～8.8%，加标回收率80.1%～104.2%。检测过程质量控制按GBZ/T 295执行；本标准方法研制依据GBZ/T 210.5。检出限与定量下限不能互换。

依据：PDF 第 5 页，8.5；PDF 第 5 页，10.1～10.2

哪些尿比重样品应剔除，原文单位有何注意点？

第10.3条规定在冷冻前测比重，剔除低于1.010 g/mL和大于1.030 g/mL的尿样，两个界值本身未被这两个严格不等式列为剔除条件。这里的g/mL是原PDF的写法；比重通常为无量纲，来源量纲疑点保留待核实，不能擅自替换数值或把质量浓度单位套到其他指标。采样后测比重还应遵守第7.4条2 h内要求。

依据：PDF 第 5 页，10.3；PDF 第 4 页，7.4

标准验证了哪些离子不干扰，图1中目标物是哪一峰？

第10.4条记载氟离子、氯乙酸根、氯离子、二氯乙酸根、亚硝酸根、硝酸根、碳酸根、硫酸根＋三氯乙酸根、磷酸根等经实验不存在干扰。图1中9号为亚硫基二乙酸根（TDGA），8号为硫酸根＋三氯乙酸根，10号为磷酸根。图示峰号不能替代第4章要求的保留时间定性，也不能把已验证离子扩展为“所有杂质均不干扰”。

依据：PDF 第 5 页，10.4～10.5、图1；PDF 第 6 页，图1图注；PDF 第 3 页，4

来源与版本

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封面载明实施日期；未取得独立现行性/废止状态核查证据。

资料获取时间：2026-09-26T08:11:30.731319+00:00。PDF：6 页。